ISSN:
1432-0584
Keywords:
Nucleus
;
Nuclear protein
;
Histone
;
Granulocyte
;
Leukocyte
;
Nuklearproteine
;
Histone
;
Granulozyten
;
Leukozyten
Source:
Springer Online Journal Archives 1860-2000
Topics:
Medicine
Description / Table of Contents:
Summary Alterations in nuclear proteins during maturation may be responsible for gene activation and repression. Study of these proteins requires: (1) a system for separating cells into varying degrees of maturity, and (2) a procedure for separating the nuclear proteins. The former was accomplished using Ficoll/Hypaque density gradients to separate rabbit granulocyte precursors. Erythrocytes and their precursors were removed by hypotonic lysis. Histones were extracted from purified nuclei with sulfuric acid, and analyzed on polyacrylamide gels containing urea. Residual non-histone proteins were separated by electrophoresis on sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gels. Quantitation of nuclear proteins during development shows no change in the histones, but a significant increase in the non-histone proteins. Therefore, the ratio of non-histone to histones increases progressively during maturation. Histone electrophoresis revealed no significant qualitative or quantitative changes in their five major classes during development. By contrast, electrophoretic analysis of the non-histone proteins revealed distinct changes which include a striking decrease in low molecular weight protein during maturation, and also certain changes in other peptide bands. These changes may reflect alterations in nuclear structure, a changing complement of the nuclear proteins involved in genetic regulation, or a combination of both.
Notes:
Zusammenfassung Veränderungen der Kernproteine während der Zellreifung können für die Gen-Aktivierung und -Repression verantwortlich sein. Eine Untersuchung dieser Proteine erfordert: 1. Ein System zur Separierung von Zellen verschiedener Reifestufen; 2. eine Methode zur Separierung der Kernproteine. Das erstere wurde durch Separation von granulozytären Vorläuferzellen des Kaninchens im Ficoll-Hypaque-Dichtegradienten erreicht; hierbei wurden Erythrozyten und ihre Vorläufer durch hypotone Lyse entfernt. Sodann wurden Histone aus gereinigten Kernextrakten durch Schwefelsäure extrahiert und auf harnstoffhaltigem Polyacrylamid-Gel analysiert. Die restlichen Proteine wurden elektrophoretisch auf Polyacrylamid-Gel getrennt. Während der Zellentwicklung zeigen die Kernproteine keine quantitativen Änderungen der Histone, jedoch eine signifikante Zunahme der Nicht-Histon-Proteine. Das Verhältnis von Nicht-Histonen zu Histonen nimmt deshalb während der Zellreifung ständig zu. Die Histon-Elektrophorese deckte keine signifikanten oder quantitativen Veränderungen in den fünf Hauptgruppen während der Reifung auf. Im Gegensatz hierzu zeigte die elektrophoretische Analyse der Nicht-Histon-Proteine deutliche Veränderungen, wie z.B. eine wesentliche Abnahme der niedrigmolekularen Proteine während der Reifung und bestimmte Veränderungen in anderen Peptidbanden. Diese Befunde können Veränderungen in der Kernstruktur oder einen wechselnden Anteil an Kernproteinen der genetischen Regulation bzw. beides widerspiegeln.
Type of Medium:
Electronic Resource
URL:
http://dx.doi.org/10.1007/BF01039655
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